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關于紫外分光光度法測定維生素A的含量

作者: 2018年07月30日 來源:全球化工設備網(wǎng) 瀏覽量:
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關鍵詞:維生素A;紫外分光光度計;美析儀器:UV-1100;UV-12001.原理維生素A的異丙醇溶液在325nm波長下有最大吸收峰,其吸光度與維生素A的含量成正比。本法的靈敏度較比色法高,可測定維生素A含量低于5µg/g

關鍵詞:維生素A;紫外分光光度計;

美析儀器:UV-1100;UV-1200

1.原理

維生素A的異丙醇溶液在325 nm波長下有最大吸收峰,其吸光度與維生素A的含量成正比。本法的靈敏度較比色法高,可測定維生素A含量低于5µg/g的樣品。主要缺點是在維生素A最大吸收波長325 nm附近許多其他化合物也有吸收,干擾測定,故本法適用于透明魚油,維生素A的濃縮物等純度較高的樣品。對于一般樣品,測定前必須先將脂肪抽提出來進行皂化,萃取其不皂化部分,再經(jīng)柱層析除去干擾物。

2.儀器

紫外分光光度計; UV-1100;UV-1200。

3.試劑

①異丙醇。

②維生素A標準溶液:稱取1 g相當于50 000國際單位維生素A的濃魚肝油0.1000 g,加異丙醇溶解,定容至125 mL。此溶液1 mL相當于40國際單位(即40 IU.mL-1)。

4.測定步驟

①標準曲線繪制:分別取維生素A標準溶液(40 IU·mL-1)O.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0 mL,于10 mL棕色容量瓶中,用異丙醇定容。以空白液調(diào)儀器零點,于紫外分光光度計上在325 nm波長下分別測定吸光度,繪制標準曲線。

②樣品測定:稱取適量樣品,按照三氯化銻比色法進行皂化、提取、洗滌、濃縮、蒸發(fā)醚層后,迅速用異丙醇溶解并移人50 mL容量瓶中,用異丙醇定容,于紫外分光光度計325nm處測定其吸光度,從標準曲線上查出相當?shù)木S生素A含量。

5.計算    X=[(c*V)/m]*100

式中:

X——樣品維生素A的含量,IU·(100 g) -1;

c——由標準曲線查得的維生素A含量,IU·mL-1;

V——樣品的異丙醇溶液體積,mL;

m——樣品質(zhì)量,g。

 

關鍵詞:維生素A;紫外分光光度計;

美析儀器:UV-1100;UV-1200

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